Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病病人进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次浮现胰脏自身病原体到浮现1同型冠心病临床呕吐的方面率在儿童时期就有很好的详细描述，多个胰脏自身病原体里性的儿童里有70%在胰岛素转换后10年内患上冠心病，而随访15年的儿童这一百分比降低到84%。相比之下，占临床1同型冠心病一半以上的同型1同型冠心病的患病选择性还从未得到充分的研究者。

越来越多的人开始应用于分期系统来概念1同型冠心病的方面：母体在浮现多种胰脏自身病原体时踏入第1阶段，浮现血糖出现异常时踏入第2阶段，浮现呕吐时踏入第3阶段。一些多发胰脏自身病原体里性的母体，在1期和2期，方面较较慢，并转型为患病的1同型冠心病。我们前详细描述了一两组在首次侦测到多种胰脏自身病原体结果显示后至少10年无冠心病的极较慢方面者，这两组病患者人数少，但不同之处非常明确。随后，我们发现胰脏自身特异性特异性CD8+T巨噬细胞反应在方面缓较慢的病患者里基本不存在，但在近期患病和与此之外的冠心病病患者里很容易侦测到。这似乎表明，与方面病患者相比，这些病患者自身免疫细胞的调节进一步提高。

最初研究者表明，尽管调节性T巨噬细胞(Treg)数量正常，但冠心病病患者存在一些特性缺陷，其里还包括对IL-2的反应能力降低。此外，冠心病病患者里的畸变CD4+T巨噬细胞似乎对调节兼具抵抗性，体现为畸变T巨噬细胞的消除减弱，人为消除的Treg和体外消除的诱导Treg，以及特异性随之而来的CD4+T巨噬细胞里IL-2反应减弱。本研究者的意在是详细描述了CD4+调节性T巨噬细胞(Treg)在一个大极缓较慢方面者里的不同之处，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方法：BOX研究者是一项以群体进一步将的纵向研究者，在21岁以下确诊的病患者血亲里检查1同型冠心病的危险因素。我们前详细描述了长期缓较慢方面者的不同之处，他们保持一致多重胰脏自身病原体里性超过10年，但从未浮现冠心病的临床呕吐，较慢性或非癫痫自身免疫。随后，10名继续保持一致无冠心病并愿意提供大量血液结果显示的缓较慢方面者纳入T和B巨噬细胞特性研究者。在目前的研究者里，8名较慢方面者(SP两组)，里位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁相互间的胰脏自身病原体里性。所有的发起者都保持稳定1同型冠心病方面的1期，尽管一些人随后失去了胰脏自身病原体对某些特异性的里性，然而，一名病患者现在保持稳定2期至少6年，但从未浮现临床呕吐，一名病患者被治疗为冠心病，该受试者72岁，在采集实验室结果显示时，其HbA1c下降到53 mmol/mol(7%)，在数据研究者里对该ADP进行时了单独后果评估。分离外周血单个核反应巨噬细胞(PBMCs)，采用多数值流式巨噬细胞术和T巨噬细胞消除试验后果评估ADP里Treg的增益、表同型和特性。应用于FlowSOM和CITRUS(聚类深入研究者、举例来说和回归)进行时无指导聚类研究者，后果评估Treg表同型。

结果：与卫生ADP相比，来自较慢方面体的潜意识CD4+T巨噬细胞的指导聚类表明，触发的潜意识CD4+ Treg增益降低，与糖皮质激素诱导的TNFR之外细胞内(GITR)隐含降低有关。一名HbA1c下降的病患者与方面缓较慢者和反之亦然的对照两组相比，Treg谱各有不同。特性研究者表明，与卫生ADP相比，来自缓较慢方面体的Treg介导的CD4+畸变T巨噬细胞消除明显受损。体现为对畸变CD4+T巨噬细胞CD25和CD134隐含的消除降低。

由此可知1 深入的表同型研究者表明，CD4+Treg亚同型在较慢方面队列里降低。由FlowSOM聚合的Treg室，聚集在来自所有ADP的活着CD4+CD45RA -巨噬细胞上。根据标示出物隐含深入研究者成10个元簇:潜意识T巨噬细胞_1;潜意识T cell_2;潜意识T cell_3;潜意识T cell_4;CD49b潜意识T巨噬细胞;HLA-DR + GITR +潜意识T巨噬细胞;寄存器Treg_1;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;和寄存器Treg_4。(a)应用于9个不同Treg标示出聚合的10个元簇的MST。每个路由表代表一个协同(100个协同)，更大的元协同(10个元协同)在路由表两组周围上色。每个路由表里的煎饼由此可知声称单个标示出的隐含行政级别。(b)每个元聚类的热由此可知，以表明主体标示出隐含。(c, d)为HD两组(c)和SP两组(d)聚合由此可知，以及FlowSOM识别的每个元簇的裂口。(e-l)相对来说总质量为每个metacluster箱线由此可知(总质量> 0.05%)已确定为HD和SP两组:寄存器Treg_2 (e),寄存器Treg_3 (f),寄存器Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +潜意识T巨噬细胞(h)、潜意识T cell_1(i),潜意识T cell_2 (j),潜意识T cell_3 (k) n d CD49b潜意识T巨噬细胞(l)。粉红色橘色代表理应SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon相加符号秩筛选。此键适用于由此可知形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

由此可知2 应用于CITRUS的研究者表明属实，Treg增益的降低是方面缓较慢的标志。AO奈斯(a - f)和柑橘研究者(g-k)来得SP发起者和反之亦然的HD发起者在CD4+CD45RA−T巨噬细胞上的差异。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群体的纪念性由此可知。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3可溶性，然后通过HLA-DR和GITR隐含进行时分离，精心设计FlowSOM群体。(b) HD(小点)和SP(蓝点)两组以及ADPSP 606(粉红色)里CD25+ cd127的增益概述由此可知。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+奈斯侄集的箱线由此可知;(c) HLA-DRloGITR−(寄存器Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(寄存器Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(寄存器Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+寄存器T cell)。(g - i)油菜簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3隐含强度着色，箭头突成的簇被识别为SP和HD队列相互间的不同。(j)箱线由此可知表明了在SP(蓝点)和HD(灰点)两组里，CITRUS潜意识Treg_3和Treg_4的相对来说总质量(百分比)。(k)直方由此可知表明每个簇的表同型(粉红色)和Treg标示出相对来说隐含与取材隐含(白色);上列，寄存器Treg_3;上头恰巧，寄存器Treg_4。取材与所有其他簇里标示出的隐含有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon相加符号秩筛选

由此可知3 与卫生献血者相比，方面缓较慢者潜意识treg的GITR降低。每个潜意识CD4+T巨噬细胞元簇(潜意识T巨噬细胞_1;潜意识T cell_2;潜意识T cell_3;CD49b +潜意识T巨噬细胞;HLA-DR + GITR +潜意识T巨噬细胞;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)侦测每个隐含标示出的改变。(a,b)来自HD (a)和S (b)队列的隐含热由此可知(sp606不还包括在内)。(c,d)潜意识Treg_4元簇里所有HD(灰色)、所有SP(白色)和SP 606(粉红色)的FlowSOM GITR隐含串联，表明直方由此可知(c)和概述由此可知(d)。Wilcoxon相加符号秩和筛选，p< 0.07(粉红色)所有ADP还包括，p< 0.05(白色)ADPSP 606和反之亦然的HD不还包括在测试里。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs里GITR隐含，从AO奈斯，从所有HD(灰色)、所有SP(白色)和SP 606(粉红色)串联，表明直方由此可知(e)和概述由此可知(f) *p< 0.05, Wilcoxon相加符号秩筛选

由此可知4 来自缓较慢方面的CD4+ treg巨噬细胞控制畸变CD4+T巨噬细胞的能力降低。SP两组用白色的线和橘色声称，HD两组用黑色的线和橘色声称，粉红色的线/橘色声称ADPsp606。应用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T巨噬细胞进行时分选。CD4+CD25−(转发者)被标示出为CFSE, Treg按观察的百分比滴定。用抗CD3 /28微珠还原巨噬细胞，指导3同月进行时流式巨噬细胞术侦测。(a-d)与CD4+转发者相对来说应的treg指导(内皮)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD转发者指导。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE消除百分比(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的消除百分比。应用于里性对照(触发的响应巨噬细胞不含treg)量化消除百分比。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差研究者。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重来得测试

由此可知5 畸变CD4+T巨噬细胞对缓较慢方面的T巨噬细胞还原的消除更寻常。SP两组用白色的线和橘色声称，HD两组用黑色的线和橘色声称，粉红色的线/橘色声称ADPsp606。应用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T巨噬细胞进行时分选。CD4+CD25−(转发者)被cfsel标示出，treg按观察的百分比滴定。用抗CD3 /28微珠还原巨噬细胞，指导3同月进行时流式巨噬细胞术(CD25反染)和巨噬细胞因侄研究者。HD Treg与HD、SP或sp606转发者都由指导。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE消除百分比(b)。(c,d) CD25消除百分比(c)和CD134消除百分比(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共指导里的隐含。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差研究者。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重来得测试

假设：我们得成的假设是，来自缓较慢方面侄的还原潜意识CD4+Treg在GITR隐含里得到了延展和丰富，强调了进一步研究者Treg在1同型冠心病后果母体里的一般而言的必要。

原文里有：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28